ABSTRACT
Las células estromales son las células más abundantes presentes en la decidua y juegan un papelmuy importante durante la implantación, la nutrición fetal y el mantenimiento del embarazo. Losprocedimientos que se han descrito para el aislamiento de células estromales requieren el uso de muchosanticuerpos monoclonales ya que hay contaminación con otros tipos celulares en la decidua y ademásalgunos marcadores características de células estromales, muestran variabilidad en los diferentes díasde la gestación. En este estudio se estandarizó un procedimiento de aislamiento por digestión enzimática,gradiente de densidad y adherencia al plástico y se caracterizaron las células estromales murinas porexclusión de marcadores que se expresan en macrófagos (F4-80), células epiteliales y trofoblasto(citoqueratina-7), obteniéndose un 98% de células negativas para estos marcadores que correspondería alas células estromales. Esta técnica de aislamiento permite obtener células estromales con métodos menoscostosos y altamente eficientes que facilita el acceso a un modelo celular de gran utilidad en el estudio dela fisiología de la gestación en diferentes especies.
Stromal cells are the most abundant cell population present in decidual tissue; they are involved inkey processes during embryo implantation, fetal nutrition and the pregnancy maintenance. Described procedures for stromal cells isolation require the use of many monoclonal antibodies due to contaminationwith another cell types in the decidua; besides, some markers of stromal cells show variability during thedays of gestation. In this study, we standardized a procedure for isolation by enzymatic digestion, densitygradient and adherence to plastic. Murine stromal cells were characterized by exclusion of markers thatare expressed in macrophages (F4-80), epithelial cells and trophoblast (cytokeratin-7), yielding a 98% ofnegative cells for these markers that correspond to stromal cells. This isolation procedure permits to obtainstromal cells with less expensive and high efficiency methods that provide a useful cellular model to studythe physiology of gestation in different species.
As células estromales são as células mais abundantes presentes na decídua e tem um papel muitoimportante durante a implementação, a nutrição fetal e a manutenção da gravidez. Os procedimentosdescritos para o isolamento das células estromales necessitam o uso de muitos anticorpos monoclonais jáque há contaminação com outros tipos celulares na decídua e demais alguns marcadores característicosdas células estromales que tem variabilidade nos diferentes dias de gestação. No presente trabalho foiestandardizado um procedimento de isolamento por digestão enzimática, gradiente de densidade eaderência ao plástico e foram caracterizados as células estromales murinas por exclusão de marcadoresque expressão em macrófagos (F4-80), células epiteliais e trofoblasto (citoqueratina-7), obtendo-se um98% de células negativas para estes marcadores que corresponderia às células estromales. Esta técnicade isolamento permite obter células estromales com métodos menos custosos e altamente eficientes quefacilita o aceso a um modelo celular de grande utilidade no estudo da fisiologia da gestação em diferentesespécies.